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SPU-ZDEC陽性對照材料與細(xì)胞毒性檢測介紹

更新時間:2023-02-20      瀏覽次數(shù):1579
  SPU-ZDEC陽性對照材料具有材料均勻、性質(zhì)穩(wěn)定,細(xì)胞毒性試驗結(jié)果具有可重復(fù)性,可以作為醫(yī)療器械生物學(xué)評價-體外細(xì)胞毒性測定的對照材料。
 
  SPU-ZDEC陽性對照材料是由hatanoresearchinstitute食品藥品安全中心研發(fā)生產(chǎn),廣泛應(yīng)用于體外細(xì)胞毒性實驗,植入實驗等,可以滿足GB/T16886.5和ISO10993.5醫(yī)療器械生物學(xué)評價標(biāo)準(zhǔn)中對陽性對照材料-二乙基二硫代氨基甲酸鋅的聚氨酯膜(SPU-ZDEC)的技術(shù)參數(shù)要求。
 
  細(xì)胞毒性檢測是利用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),采用細(xì)胞毒性試驗評價一種器材、材料或藥物引起的細(xì)胞死亡、細(xì)胞生長抑制或者細(xì)胞方面其他的影響。體外細(xì)胞毒性試驗具有通用性的特點,能夠廣泛適用于各種醫(yī)療器械和材料的評價。進(jìn)而檢測樣品的材質(zhì)是否導(dǎo)致細(xì)胞損傷、細(xì)胞生長、細(xì)胞代謝變化,甚至引發(fā)死亡。常分為直接接觸實驗、間接接觸實驗、浸提液實驗三類。
 
  用培養(yǎng)基將細(xì)胞調(diào)整為1×106個/mL,分別加入Calcein-AM至終濃度2μmol/L、CellTrackerDeepRedDye至終濃度0.1μmol/L,37℃避光孵育30min后,PBS清洗2遍后用培養(yǎng)基將細(xì)胞密度調(diào)整為2×105個/mL,加入96孔U型底板,每孔加入100μL;向培養(yǎng)板各孔中加入不同濃度的毒性物質(zhì)(藥物、化學(xué)試劑等待檢測物質(zhì)),并定容至200μL。
 
  將培養(yǎng)板置于1000r/min離心1min,放入37℃培養(yǎng)箱靜置4h進(jìn)行殺傷后,吹勻細(xì)胞,用流式細(xì)胞儀上樣,注意進(jìn)樣相同體積數(shù)的分組樣品。雙陽性細(xì)胞群為剩余活的細(xì)胞。設(shè)置陽性對照:標(biāo)記過的細(xì)胞不加材料。細(xì)胞毒性(%)=(空白對照讀數(shù)-實驗組讀數(shù))/空白對照讀數(shù)×100%。
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